健脑益智汤对阿尔茨海默病大鼠P53的影响

目的研究健脑益智汤对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马P53蛋白表达的影响,探讨其对AD细胞凋亡的防治作用机制。方法正常老年大鼠60只,分为对照组、模型组、安理申组、健脑益智汤小、中和大剂量组,采用侧脑室注射聚集态Aβ_(25~35)建立AD模型,药物灌胃4周,Western-blot法检测海马P53蛋白及磷酸化P53(Ser15)蛋白(pP53-Ser15)表达水平。结果与对照组比,模型组P53及p P53-Ser15的表达增多(P0.01);与模型组比,安理申组P53蛋白降低(P0.01),pP53-Ser15降低无统计学意义,健脑益智汤随剂量增加,P53蛋白及pP53-Ser15呈下降趋势(P0.05,P0.01);健脑益智汤大剂量组pP53-Ser15下降较安理申组明显(P0.05)。结论健脑益智汤降低AD大鼠细胞凋亡的可能机制是通过降低P53及pP53-Ser15蛋白的表达来实现的。     

健脑益智汤对类阿尔茨海默病大鼠学习记忆的影响和机制

目的　观察健脑益智汤对类阿尔茨海默病（AD）大鼠学习记忆的影响，并探讨其可能的作用机制。 方法　老年大鼠侧脑室注射聚集态的Aβ25 35建立复合式类AD大鼠模型，分为模型组、盐酸多奈哌齐组〔0.525 mg/（kg·d）〕、健脑益智汤小剂量组〔10.6 g/（kg·d）〕、健脑益智汤中剂量组〔21.2 g/（kg·d）〕和健脑益智汤大剂量组〔42.4 g/（kg·d）〕,治疗21天,并且采用Morris水迷宫测试各组大鼠学习记忆能力，并检测血清乙酰胆碱酯酶（AchE）、丁酰胆碱酯酶(BchE)。 结果 盐酸多奈哌齐组，健脑益智汤小剂量组、中剂量组和大剂量组逃避潜伏期均较模型组减少 (P<0.01,P<0.05)；而健脑益智汤小、中及大剂量组与盐酸多奈哌齐组比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。健脑益智汤大、中剂量组对AchE、BchE活性虽有降低的趋势，但与盐酸多奈哌齐组比较，差异无统计学意义（P>0.05）；并且对类AD大鼠学习记忆能力的改善作用二者也无明显差别。结论 健脑益智汤可以通过对胆碱酯酶活性影响，进而改善类AD大鼠的学习记忆能力。     

健脑益智汤对类阿尔茨海默病大鼠血清胆碱酯酶和脑皮质细胞凋亡的影响

目的:观察健脑益智汤对阿尔茨海默病(AD)大鼠血清乙酰胆碱酯酶(AChE)和脑皮质细胞凋亡的影响。方法:老年Wistar大鼠侧脑室注射聚集态的β-淀粉样蛋白25-35(Aβ_(25-35))建立复合式类AD大鼠模型,测定健脑益智汤灌胃给予AD大鼠(10.6,21.2,42.4g·kg~(-1),qd)3周后血清AChE和脑皮质细胞凋亡百分率,实验设立盐酸多奈哌齐(0.525 mg·kg~(-1))作为阳性对照组。结果:与正常对照组比较,AD模型组血清AChE活性增强(P<0.01),脑皮质细胞凋亡百分率显著增加(P<0.01);与模型组比较,健脑益智汤中、高剂量组AChE活性和脑皮质细胞凋亡百分率均降低(P<0.05,P<0.01),与盐酸多奈哌齐组接近。结论:健脑益智汤可抑制AD大鼠血清Ache活性和脑皮质细胞凋亡。     

大鼠CnA/EGFP基因共表达的真核表达质粒的构建

目的：构建大鼠钙调磷酸酶A亚基（CnA）α基因/EGFP共表达的真核表达质粒，为研究钙调磷酸酶基因在缺血缺氧再灌注诱导的心肌细胞凋亡中的作用提供生物表达系统。 方法：RT-PCR方法扩增大鼠CnA基因(约1 590 bp)，克隆至T载体，经酶切鉴定和DNA测序证实CnA序列正确后，再用内切酶将CnA从T- CnA质粒中切出，与已插入报告基因IRES-EGFP基因片段的重组pShuttle2载体（pShuttle2-IRES-EGFP）连接,构建CnA/EGFP共表达的真核表达质粒pShuttle2- CnA -IRES-EGFP。 结果：DNA测序结果显示扩增的CnA DNA序列与相应的GenBank(NM_017041)所公布的序列完全相同；Nhe Ⅰ和Not Ⅰ双酶切重组质粒pShuttle2-CnA-IRES-EGFP,1%的琼脂糖凝胶电泳分析可见大小分别为1 590 和5 240 bp两条片段,与预期值相符。 结论：成功构建了以增强型绿色荧光蛋白（EGFP）标记的大鼠CnA基因的真核表达质粒。